發(fā)布日期：2018-09-05
各有關(guān)單位：
為進(jìn)一步規(guī)范腫瘤相關(guān)突變基因檢測(cè)產(chǎn)品的注冊(cè)申報(bào)和技術(shù)審評(píng)，提高審評(píng)效率，統(tǒng)一審評(píng)尺度，根據(jù)原國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局2018年度醫(yī)療器械注冊(cè)技術(shù)指導(dǎo)原則制修訂計(jì)劃的有關(guān)要求，我中心組織起草了《沙眼衣原體和/或淋病奈瑟菌核酸檢測(cè)試劑注冊(cè)技術(shù)審查指導(dǎo)原則》。經(jīng)文獻(xiàn)匯集、企業(yè)調(diào)研、專(zhuān)題研究和專(zhuān)家討論，形成了征求意見(jiàn)稿。
為使該指導(dǎo)原則更具有科學(xué)合理性及實(shí)際可操作性，即日起在我中心網(wǎng)上公開(kāi)征求意見(jiàn)，衷心希望相關(guān)領(lǐng)域的專(zhuān)家、學(xué)者、管理者及從業(yè)人員提出意見(jiàn)或建議，推動(dòng)指導(dǎo)原則的豐富和完善。
請(qǐng)將意見(jiàn)或建議以電子郵件的形式于2018年10月8日前反饋我中心。
聯(lián)系方式：
聯(lián)系人：包雯、韓從音
電 話：010-86452596、010-86452581
電子郵箱：baowen@cmde.org.cn ；hancy@cmde.org.cn
附件：1．《沙眼衣原體和/或淋病奈瑟菌核酸檢測(cè)試劑注冊(cè)技術(shù)審查指導(dǎo)原則》（征求意見(jiàn)稿）
2．意見(jiàn)征集表
國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局醫(yī)療器械技術(shù)審評(píng)中心
2018年9月4日
附件1
沙眼衣原體和/或淋病奈瑟菌核酸檢測(cè)試劑注冊(cè)技術(shù)審查指導(dǎo)原則
（征求意見(jiàn)稿）
一、前言
本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊(cè)申請(qǐng)人對(duì)沙眼衣原體和/或淋病奈瑟菌核酸檢測(cè)試劑注冊(cè)申報(bào)資料的準(zhǔn)備及撰寫(xiě)，同時(shí)也為技術(shù)審評(píng)部門(mén)審評(píng)注冊(cè)申報(bào)資料提供參考。
本指導(dǎo)原則是對(duì)沙眼衣原體和/或淋病奈瑟菌核酸檢測(cè)試劑的一般要求，申請(qǐng)人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對(duì)注冊(cè)申報(bào)資料的內(nèi)容進(jìn)行充實(shí)和細(xì)化。
本指導(dǎo)原則是供申請(qǐng)人和審查人員使用的指導(dǎo)性文件，不涉及注冊(cè)審批等行政事項(xiàng)，相關(guān)人員應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。
本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)的不斷完善和科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時(shí)進(jìn)行調(diào)整。
二、范圍
沙眼衣原體和/或淋病奈瑟菌核酸檢測(cè)試劑是指基于分子生物學(xué)相關(guān)方法的核酸檢測(cè)技術(shù)，以沙眼衣原體和/或淋病奈瑟菌核酸序列為檢測(cè)靶標(biāo)，對(duì)來(lái)自人泌尿生殖道（如女性的宮頸或陰道拭子、男性的尿道拭子、男性或女性的尿液等）中的沙眼衣原體和/或淋病奈瑟菌進(jìn)行體外定性檢測(cè)的試劑。結(jié)合臨床表現(xiàn)和其他實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)，本類(lèi)產(chǎn)品可用于泌尿生殖道相關(guān)病原體感染的篩查或鑒別診斷。
衣原體是一種革蘭陰性微生物，具有特殊發(fā)育周期，鏡檢可觀察到原體（EB）和始體（RB）兩種形態(tài)結(jié)構(gòu)。根據(jù)主要外膜蛋白抗原表位的差異，已發(fā)現(xiàn)多種引起人類(lèi)疾病的沙眼衣原體血清型，包括沙眼血清型（A、B、Ba、C）、生殖血清型（D、Da、E、F、G、H、I、Ia、J、Ja、K）以及罕見(jiàn)變異型（L1、L2、L2a、L3）等。
生殖道沙眼衣原體感染是常見(jiàn)的性傳播疾病。沙眼衣原體引起的疾病范圍廣泛，可累及眼、生殖道、直腸等多個(gè)臟器，也可發(fā)生母嬰傳播。根據(jù)臨床表現(xiàn)分為具有泌尿生殖道癥狀體征的患者，無(wú)癥狀感染者和新生兒感染。男性常見(jiàn)的表現(xiàn)是尿道炎、附睪炎，女性則為宮頸炎、尿道炎、盆腔炎，也可誘發(fā)生育能力下降，新生兒結(jié)膜炎等。
實(shí)驗(yàn)室診斷方法包括①顯微鏡檢查：適用于新生兒眼結(jié)膜刮片的檢查；②培養(yǎng)法：沙眼衣原體細(xì)胞培養(yǎng)陽(yáng)性；③抗原檢測(cè)：酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、直接免疫熒光法或免疫層析試驗(yàn)檢測(cè)沙眼衣原體抗原陽(yáng)性；④抗體檢測(cè)：新生兒衣原體肺炎中沙眼衣原體IgM抗體滴度升高；⑤核酸檢測(cè)：沙眼衣原體核酸檢測(cè)陽(yáng)性。
淋病奈瑟菌是一種革蘭陰性的專(zhuān)性需氧雙球菌，細(xì)胞色素氧化酶陽(yáng)性，部分菌株具有質(zhì)粒介導(dǎo)的耐藥性。
淋病是我國(guó)性傳播疾病的主要病種之一，由淋病奈瑟菌感染所致，特點(diǎn)為潛伏期短、傳染性強(qiáng)，如不及時(shí)治愈可出現(xiàn)嚴(yán)重的并發(fā)癥和后遺癥。根據(jù)臨床表現(xiàn)分為有癥狀的泌尿生殖系統(tǒng)感染（常見(jiàn)表現(xiàn)為化膿性炎癥），無(wú)癥狀的泌尿生殖系統(tǒng)感染，眼、咽、皮膚、直腸、盆腔等部位的感染，以及血行播散式感染。男性常見(jiàn)的表現(xiàn)是尿道炎，并發(fā)癥有附睪炎、前列腺炎、精囊炎等；女性常見(jiàn)的表現(xiàn)是宮頸炎、尿道炎、前庭大腺炎、肛周炎，并發(fā)癥有盆腔炎；也可誘發(fā)生育能力下降，新生兒結(jié)膜炎等。
實(shí)驗(yàn)室診斷方法包括①顯微鏡檢查：取男性尿道分泌物涂片做革蘭染色，革蘭陰性雙球菌為陽(yáng)性；②淋病奈瑟菌分離培養(yǎng)：為淋病的確診試驗(yàn)，通過(guò)菌落特征、氧化酶試驗(yàn)、Superoxol試驗(yàn)和革蘭染色初步鑒定，也可結(jié)合糖發(fā)酵試驗(yàn)或熒光抗體試驗(yàn)進(jìn)一步確認(rèn)；④抗原檢測(cè)：淋病奈瑟菌抗原陽(yáng)性；③核酸檢測(cè)：淋病奈瑟菌核酸檢測(cè)陽(yáng)性。
本指導(dǎo)原則適用于基于實(shí)時(shí)熒光定量PCR（Real-time Quantitative polymerase chain reaction, qPCR）方法的沙眼衣原體和/或淋病奈瑟菌檢測(cè)試劑。對(duì)于其他分子生物學(xué)的方法，如PCR-反向斑點(diǎn)雜交法(reverse dot blot，RDB)、實(shí)時(shí)熒光核酸恒溫?cái)U(kuò)增檢測(cè)(Simultaneous Amplification and Testing，SAT)、轉(zhuǎn)錄介導(dǎo)的擴(kuò)增技術(shù)（transcription mediated amplification,TMA）、鏈置換擴(kuò)增技術(shù)（strand displacement amplification,SDA）等，可能部分要求不完全適用或本文所述內(nèi)容不夠全面，申請(qǐng)人可以根據(jù)產(chǎn)品特性對(duì)適用部分進(jìn)行評(píng)價(jià)或補(bǔ)充其他的評(píng)價(jià)資料進(jìn)行相應(yīng)性能的驗(yàn)證，但需闡述不適用的理由，并說(shuō)明替代方法的科學(xué)合理性。
本指導(dǎo)原則適用于進(jìn)行產(chǎn)品注冊(cè)和相關(guān)許可事項(xiàng)變更的產(chǎn)品。
三、注冊(cè)申報(bào)資料要求
?。ㄒ唬┚C述資料
綜述資料主要包括產(chǎn)品預(yù)期用途、產(chǎn)品描述、有關(guān)生物安全性的說(shuō)明、研究結(jié)果的總結(jié)評(píng)價(jià)以及同類(lèi)產(chǎn)品上市情況介紹等內(nèi)容，其中同類(lèi)產(chǎn)品上市情況介紹部分應(yīng)著重從方法學(xué)及不同型別檢出能力等方面寫(xiě)明擬申報(bào)產(chǎn)品與目前市場(chǎng)上已獲批準(zhǔn)的同類(lèi)產(chǎn)品之間的主要區(qū)別。對(duì)于本類(lèi)申報(bào)產(chǎn)品，應(yīng)著重從樣本類(lèi)型、樣本采集與制備方式、目標(biāo)基因片段的選擇、可檢出的沙眼衣原體血清型、淋病奈瑟菌菌株類(lèi)型、方法學(xué)特征等方面描述。
?。ǘ┲饕牧涎芯抠Y料
應(yīng)提交申報(bào)產(chǎn)品主要原材料的研究資料，內(nèi)容包括主要原材料的來(lái)源、選擇、制備方法的研究資料及其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂資料、評(píng)價(jià)結(jié)果和質(zhì)量分析證書(shū)，并詳細(xì)描述原材料的技術(shù)指標(biāo)和驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)。
1．企業(yè)內(nèi)部參考品和質(zhì)控品：
企業(yè)內(nèi)部參考品建議采用標(biāo)準(zhǔn)菌株或者臨床分離培養(yǎng)物，基質(zhì)與臨床樣本收集/保存介質(zhì)一致。應(yīng)覆蓋中國(guó)人群中常見(jiàn)的沙眼衣原體血清型和/或淋病奈瑟菌菌株，例如沙眼衣原體血清型D型、E型、F型和G型、淋病奈瑟菌標(biāo)準(zhǔn)菌株（WHO-A、B、C、D、E）等。
參考品和質(zhì)控品與待測(cè)臨床樣本在整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)保持相同的檢測(cè)方式，包括同步參與核酸提取、基因擴(kuò)增和檢測(cè)過(guò)程等。應(yīng)采用臨床參考標(biāo)準(zhǔn)或其他合理方法（如已上市同類(lèi)產(chǎn)品）對(duì)企業(yè)參考品和質(zhì)控品進(jìn)行陰陽(yáng)性確認(rèn)。
1.1陽(yáng)性參考品
陽(yáng)性參考品的設(shè)置應(yīng)考慮檢出能力的驗(yàn)證?？刹捎枚鄠€(gè)代表性菌株或者臨床分離培養(yǎng)物。每個(gè)參考品至少設(shè)置兩個(gè)；濃度水平（弱陽(yáng)性、中或強(qiáng)陽(yáng)性）。
其中沙眼衣原體陽(yáng)性參考品的設(shè)置旨在驗(yàn)證試劑盒聲稱(chēng)覆蓋的所有血清型均可以在適當(dāng)?shù)臐舛缺粰z測(cè)到。淋病奈瑟菌旨在驗(yàn)證不同變異來(lái)源的菌株（如耐青霉素、四環(huán)素、喹諾酮）均可以在適當(dāng)?shù)臐舛缺粰z測(cè)到。
1.2陰性參考品
陰性參考品的設(shè)置應(yīng)考慮檢測(cè)特異性的評(píng)價(jià)。可采用經(jīng)確認(rèn)無(wú)目標(biāo)靶基因序列或者易產(chǎn)生交叉反應(yīng)的樣本，適當(dāng)納入其他病原體樣本。
1.3靈敏度參考品
可采用標(biāo)準(zhǔn)菌株或者臨床分離培養(yǎng)物的系列梯度濃度樣本，基質(zhì)應(yīng)與適用樣本一致。應(yīng)至少包含接近產(chǎn)品最低檢出限的水平，并明確被測(cè)物的具體量值，可采用核酸定量的方法對(duì)該參考品進(jìn)行滴度確認(rèn)。其中沙眼衣原體的量值建議以EB/ml或者IFU/ml 表示，淋病奈瑟菌的量值建議以Cells/ml或者CFU/ml表示。
如沙眼衣原體的不同血清型或者淋病奈瑟菌的不同菌株的最低檢出限存在差異，應(yīng)分別設(shè)置靈敏度參考品。
1.4精密度參考品
可采用標(biāo)準(zhǔn)菌株、臨床分離培養(yǎng)物、臨床樣本或質(zhì)控物質(zhì)，至少包括陰性、弱陽(yáng)性、中等陽(yáng)性三個(gè)濃度水平。
1.5質(zhì)控品
陽(yáng)性質(zhì)控品應(yīng)包含目標(biāo)基因，用于模擬臨床陽(yáng)性樣本。陰性質(zhì)控品可為樣本收集/保存介質(zhì)，用于對(duì)污染造成的假陽(yáng)性結(jié)果進(jìn)行質(zhì)量控制。應(yīng)對(duì)質(zhì)控品的檢測(cè)結(jié)果（如Ct值）做出明確的范圍要求。
2．試劑盒主要組成成分
2.1 核酸分離/純化組分（如有）的主要組成、原理介紹及相關(guān)的驗(yàn)證資料。
2.2 PCR反應(yīng)組分的主要原料（包括引物、探針、各種酶及其他主要原料）的研究資料，主要包括以下內(nèi)容：
2.2.1 引物和探針：應(yīng)詳述引物和探針的設(shè)計(jì)原則，包括對(duì)包容性和特異性的考慮情況?？稍O(shè)計(jì)兩套或以上的引物、探針以供篩選，針對(duì)所有預(yù)期可檢出的菌株進(jìn)行檢出能力和特異性的評(píng)價(jià)；在此基礎(chǔ)上選擇最佳組合，并提供引物、探針的靶位點(diǎn)以及核酸序列。引物、探針的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)至少包括純度、濃度、分子量、標(biāo)記的熒光素及功能性實(shí)驗(yàn)等，提供驗(yàn)證資料或合成機(jī)構(gòu)出具的質(zhì)檢證明，如PAGE電泳結(jié)果或高效液相色譜法（HPLC）分析圖譜。
2.2.2酶：DNA聚合酶，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)包括DNA聚合酶活性、無(wú)核酸內(nèi)切酶活性、熱啟動(dòng)能力、熱穩(wěn)定性等；尿嘧啶糖基化酶（UNG），質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)包括尿嘧啶糖基化活性，無(wú)核酸外切酶及核酸內(nèi)切酶活性。如使用其他工具酶，應(yīng)提供相應(yīng)的質(zhì)檢證明或驗(yàn)證資料。
2.2.3脫氧三磷酸核苷（dNTP）：提供純度、濃度、保存穩(wěn)定性等的質(zhì)檢證明或驗(yàn)證資料。
2.2.4內(nèi)對(duì)照（內(nèi)標(biāo)）：是與目的核酸共同參與提取和擴(kuò)增的非目標(biāo)核酸序列（如人的管家基因、外源加入的質(zhì)粒），作用為對(duì)試劑和反應(yīng)體系的有效性、設(shè)備功能的完整性以及樣本中可能存在的抑制劑進(jìn)行質(zhì)量控制。應(yīng)對(duì)內(nèi)對(duì)照的引物、探針設(shè)計(jì)和模板濃度進(jìn)行驗(yàn)證，并明確其檢測(cè)結(jié)果（如Ct值）的上下限范圍要求。
?。ㄈ┲饕a(chǎn)工藝及反應(yīng)體系的研究資料
應(yīng)提交申報(bào)產(chǎn)品生產(chǎn)工藝的研究資料，如工作液的配制、分裝和凍干等。檢驗(yàn)方法（包括反應(yīng)體系）確認(rèn)的研究資料，包括樣本的制備方式（包括采集及處理）、樣本要求、樣本用量、試劑用量、反應(yīng)條件、校準(zhǔn)方法（如有）、質(zhì)控方法、結(jié)果判讀方式等。主要包括以下內(nèi)容：
1. 產(chǎn)品主要生產(chǎn)工藝以及關(guān)鍵質(zhì)量控制環(huán)節(jié)的描述：可以圖表方式表示，并說(shuō)明確定依據(jù)。
2. 反應(yīng)原理的描述（如試劑盒中包含核酸提取組分，應(yīng)涉及）。
3. 適用的樣本類(lèi)型：
3.1應(yīng)描述適用的樣本類(lèi)型及添加劑，進(jìn)行適用性確認(rèn)并提交研究資料。包括對(duì)樣本的收集、制備或處理、運(yùn)輸（如涉及）和儲(chǔ)存的方式進(jìn)行驗(yàn)證，必要時(shí)進(jìn)行選擇和確認(rèn)并提供相關(guān)的研究資料。不同類(lèi)型的樣本應(yīng)分別進(jìn)行研究。
3.2如涉及，提供使用不同方法采集的樣本（如拭子或其他手段）之間關(guān)系的信息。
4. 核酸提取純化方法的研究資料：無(wú)論申報(bào)產(chǎn)品是否含有DNA分離/純化的組分，企業(yè)都應(yīng)對(duì)檢驗(yàn)方法中核酸提取的環(huán)節(jié)做充分的驗(yàn)證，包括配合使用的核酸分離/純化試劑的提取效率，提取后DNA的濃度、純度和靶核酸序列的完整性。建議對(duì)核酸分離/純化過(guò)程進(jìn)行工藝優(yōu)化，盡可能增加PCR模板溶液均一性、去除PCR抑制物，不建議采用煮沸法進(jìn)行DNA提取。內(nèi)對(duì)照、質(zhì)控品均應(yīng)全程參與提取純化。
5. 確定最佳PCR反應(yīng)體系的研究資料，包括酶濃度、引物/探針濃度、dNTP濃度、陽(yáng)離子濃度、樣本量、加樣量及反應(yīng)體積等。
6. 確定PCR各階段反應(yīng)條件的研究資料，包括溫度、時(shí)間及循環(huán)數(shù)。
7. 確定基線閾值（threshold）和閾值循環(huán)數(shù)（Ct）的研究資料。
8. 如涉及不同的適用機(jī)型，應(yīng)列表對(duì)比檢驗(yàn)方法，如有差異應(yīng)分別評(píng)價(jià)。
?。ㄋ模┓治鲂阅茉u(píng)估資料
申請(qǐng)人應(yīng)當(dāng)在主要原材料和生產(chǎn)工藝經(jīng)過(guò)選擇和確認(rèn)、質(zhì)量管理體系得到有效控制并且保證產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定的基礎(chǔ)上，制訂產(chǎn)品的性能指標(biāo)以及明確驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)，并對(duì)產(chǎn)品的分析性能進(jìn)行研究。
試驗(yàn)人員應(yīng)經(jīng)過(guò)必要的培訓(xùn)，熟悉檢測(cè)系統(tǒng)的操作程序、樣本制備方式和試驗(yàn)方案，嚴(yán)格執(zhí)行校準(zhǔn)和質(zhì)量控制方法，定期對(duì)設(shè)備進(jìn)行維護(hù)和保養(yǎng)。使用多批產(chǎn)品，采用科學(xué)合理的試驗(yàn)方法進(jìn)行性能評(píng)估，在對(duì)結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)檢查后，選擇適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計(jì)方法進(jìn)行檢驗(yàn)或分析，并形成報(bào)告。樣本數(shù)量應(yīng)符合統(tǒng)計(jì)學(xué)要求。
針對(duì)不同的樣本類(lèi)型（如宮頸拭子或尿道拭子）、取樣部位（如宮頸或陰道），可能有不同的樣本收集/保存介質(zhì)。對(duì)于不同類(lèi)型的樣本、不同的收集/保存介質(zhì)，申請(qǐng)人應(yīng)分別完成性能評(píng)估，至少包括最低檢測(cè)限和精密度評(píng)價(jià)等。
各項(xiàng)性能評(píng)估應(yīng)符合下述要求：
1.陽(yáng)性/陰性參考品符合率
應(yīng)使用企業(yè)參考品或者臨床樣本進(jìn)行相應(yīng)研究。
2. 分析靈敏度（最低檢測(cè)限）
應(yīng)明確代表性參考菌株或臨床分離培養(yǎng)物的最低檢出限，并在最低檢出限或接近最低檢出限的濃度對(duì)說(shuō)明書(shū)聲稱(chēng)的所有菌株/血清型進(jìn)行驗(yàn)證。并提供上述參考菌株或臨床分離物的來(lái)源、血清型確認(rèn)及滴度確認(rèn)等試驗(yàn)信息。
方法可為選取至少兩種參考菌株或臨床分離培養(yǎng)物，分別配制系列稀釋的樣本建立最低檢測(cè)限，每個(gè)梯度的稀釋液重復(fù)3-5份，每份進(jìn)行不少于20次的重復(fù)檢測(cè)，采用95%（n≥20）的陽(yáng)性檢出率作為最低檢出限確定的標(biāo)準(zhǔn)。建議在不同的日期、不同的運(yùn)行進(jìn)行上述試驗(yàn)，以充分模擬實(shí)際使用時(shí)的變異來(lái)源。
另外，應(yīng)在最低檢測(cè)限或接近最低檢測(cè)限的滴度對(duì)至少五種參考菌株或臨床分離培養(yǎng)物進(jìn)行驗(yàn)證。
可供選取的代表性菌株舉例：
沙眼衣原體血清型B、Ba、D、E、F、G、H、I、J、K，
淋病奈瑟菌標(biāo)準(zhǔn)菌株WHO-A、B、C、D、E、G、J、P。
如申請(qǐng)人未能驗(yàn)證部分菌株，應(yīng)說(shuō)明理由。
3.分析特異性
3.1交叉反應(yīng)
建議在病毒和細(xì)菌感染的醫(yī)學(xué)相關(guān)水平進(jìn)行交叉反應(yīng)的驗(yàn)證，通常細(xì)菌感染的水平為106 CFU/mL或更高，病毒為105 PFU/mL或更高。應(yīng)提供所有用于交叉反應(yīng)驗(yàn)證的病毒和細(xì)菌的來(lái)源、種屬和濃度/滴度確認(rèn)等資料。
用于交叉反應(yīng)驗(yàn)證的病原體種類(lèi)主要考慮下述的可能性（具體項(xiàng)目見(jiàn)表1）：
3.1.1對(duì)靶位點(diǎn)與人基因組及可能存在于人類(lèi)泌尿、生殖道的微生物基因組進(jìn)行基因序列比對(duì)，如存在同源性序列則應(yīng)進(jìn)行相應(yīng)驗(yàn)證。
3.1.2人類(lèi)泌尿、生殖道寄生的微生物，可經(jīng)性傳播的其他病原體，易引起相同或相似的臨床癥狀的其他病原體，其他常見(jiàn)病原體等。
3.1.3 臨床需進(jìn)行鑒別診斷的其他情形。
表1 用于交叉反應(yīng)研究的病原體
| 人乳頭瘤病毒16型、18型、45型和31型 |
| 單純皰疹病毒Ⅱ型 |
| 梅毒螺旋體 |
| 解脲脲原體、人型支原體、生殖支原體 |
| 表皮葡萄球菌/腐生葡萄球菌/無(wú)乳鏈球菌 |
| 大腸埃希菌 |
| 陰道加德納菌 |
| 白念珠菌 |
| 陰道毛滴蟲(chóng) |
| 卷曲乳桿菌/惰性乳桿菌/克氏動(dòng)彎桿菌/陰道陌生菌/ 普雷沃菌屬/纖毛菌屬 |
| 腺病毒 |
| 巨細(xì)胞病毒 |
| 甲型鏈球菌 |
| HIV病毒 |
另外，對(duì)于沙眼衣原體和淋病奈瑟菌還應(yīng)驗(yàn)證相互之間可能存在的交叉反應(yīng)，避免混合感染產(chǎn)生的干擾。
3.2干擾物質(zhì)
應(yīng)針對(duì)不同樣本類(lèi)型，分別評(píng)價(jià)可能存在的干擾情況。建議在每種干擾物質(zhì)的潛在最大濃度(“最差條件”)進(jìn)行評(píng)價(jià)，并在待測(cè)物的醫(yī)學(xué)決定水平進(jìn)行檢測(cè)。潛在的干擾物質(zhì)包括內(nèi)源性、外源性和其他已報(bào)道的干擾物質(zhì)。
應(yīng)至少選取全血（或血紅蛋白和白細(xì)胞）、宮頸粘液、陰道常用藥物（如避孕、抗真菌藥物）、女性衛(wèi)生用品、陰道栓劑、陰道潤(rùn)滑劑、尿液常見(jiàn)干擾物（如抗生素、非甾體類(lèi)抗炎藥物）等進(jìn)行驗(yàn)證，并注明對(duì)被測(cè)物不產(chǎn)生干擾的最高限值。
4. 精密度
應(yīng)對(duì)可能影響檢測(cè)精密度的主要變量進(jìn)行驗(yàn)證，評(píng)估重復(fù)性和重現(xiàn)性，包括運(yùn)行內(nèi)的變異和運(yùn)行間、日內(nèi)、日間、批次間、操作者間、儀器間和地點(diǎn)間的變異。
建議設(shè)定合理的精密度評(píng)價(jià)周期，例如為期至少20天的檢測(cè)，每天至少由2人完成不少于2次的完整檢測(cè)，注意應(yīng)包括核酸分離/純化步驟。可采用標(biāo)準(zhǔn)菌株、臨床分離培養(yǎng)物、臨床樣本或質(zhì)控物質(zhì)進(jìn)行試驗(yàn)，至少包含3個(gè)水平：陰性樣本、略高于最低檢測(cè)限的弱陽(yáng)性樣本（如2至3倍最低檢出限水平）、中等陽(yáng)性樣本。
?。ㄎ澹╆?yáng)性判斷值或參考區(qū)間確定資料
申請(qǐng)人應(yīng)考慮不同地理區(qū)域流行病學(xué)背景以及人口統(tǒng)計(jì)學(xué)特征（包括性別、地域、種族等因素）的差異，選擇具有代表性的樣本建立陽(yáng)性判斷值（包括灰區(qū)）。對(duì)于熒光實(shí)時(shí)定量PCR方法即為用于結(jié)果判讀的Ct值的確定資料。申請(qǐng)人應(yīng)同時(shí)提供灰區(qū)的確定資料，建議從臨床意義的角度出發(fā)，合理設(shè)定灰區(qū)范圍并詳細(xì)說(shuō)明確定的依據(jù)。如采用其他研究方法，應(yīng)說(shuō)明其合理性。
另外，建議申請(qǐng)人考慮建立陽(yáng)性判斷值時(shí)使用的受試者樣本對(duì)于目標(biāo)人群的代表性，通過(guò)臨床評(píng)價(jià)進(jìn)一步驗(yàn)證和確認(rèn)陽(yáng)性判斷值或參考區(qū)間的準(zhǔn)確性。
（六）穩(wěn)定性研究資料
包括申報(bào)產(chǎn)品的穩(wěn)定性以及適用樣本的穩(wěn)定性研究。
產(chǎn)品的穩(wěn)定性包括至少三批樣品在實(shí)際儲(chǔ)存條件下保存至成品有效期后的實(shí)時(shí)穩(wěn)定性，以及試劑開(kāi)瓶穩(wěn)定性、復(fù)溶穩(wěn)定性、運(yùn)輸穩(wěn)定性及凍融次數(shù)限制等。
適用樣本的穩(wěn)定性應(yīng)針對(duì)不同的采集方法（如采樣拭子）、不同的樣本收集/保存介質(zhì)（樣本保存液及保存容器）、不同的樣本運(yùn)輸和保存條件，對(duì)不同類(lèi)型的樣本分別進(jìn)行研究。如在合理的溫度范圍內(nèi)選擇溫度點(diǎn)，每間隔一定的時(shí)間對(duì)儲(chǔ)存的樣本進(jìn)行性能評(píng)估（包括最低檢測(cè)限和精密度），從而確認(rèn)不同類(lèi)型樣本的穩(wěn)定性。對(duì)于冷凍保存的樣本還應(yīng)評(píng)價(jià)凍融次數(shù)。
上述研究結(jié)果應(yīng)在說(shuō)明書(shū)【儲(chǔ)存條件及有效期】和【樣本要求】?jī)身?xiàng)中載明。
?。ㄆ撸┡R床試驗(yàn)
臨床試驗(yàn)的開(kāi)展、方案的制定以及報(bào)告的撰寫(xiě)等均應(yīng)符合相關(guān)法規(guī)及《體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第16號(hào)）的要求。
1.試驗(yàn)方法
對(duì)于沙眼衣原體和/或淋病奈瑟菌核酸檢測(cè)試劑而言，臨床試驗(yàn)可采用試驗(yàn)用體外診斷試劑與臨床普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的已上市同類(lèi)產(chǎn)品進(jìn)行比較研究試驗(yàn)，證明兩者具有等效性，從而間接證明試驗(yàn)用體外診斷試劑臨床性能能夠滿(mǎn)足預(yù)期用途的要求。對(duì)比試劑在預(yù)期用途、適用人群、樣本類(lèi)型、檢測(cè)性能等方面應(yīng)與試驗(yàn)用體外診斷試劑具有較好的可比性。另外，申請(qǐng)人還應(yīng)選取一定數(shù)量的新鮮采集樣本與臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室已建立的參考方法-病原體分離培養(yǎng)鑒定進(jìn)行比較研究試驗(yàn)，以進(jìn)一步確認(rèn)核酸檢測(cè)的準(zhǔn)確性。
對(duì)于比較研究試驗(yàn)中測(cè)定結(jié)果不符的樣本，應(yīng)采用臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室已建立的參考方法（如病原體分離培養(yǎng)鑒定）或者其他合理的方法（如第三方試劑、臨床普遍認(rèn)為靈敏度和特異性較好的核酸序列測(cè)定方法）進(jìn)行復(fù)核。
2.試驗(yàn)機(jī)構(gòu)
應(yīng)考慮擬申報(bào)產(chǎn)品的特點(diǎn)和預(yù)期用途，結(jié)合流行病學(xué)背景，選擇具有一定地域代表性的試驗(yàn)機(jī)構(gòu)和受試者。原則上應(yīng)具有分子生物學(xué)方法檢測(cè)以及相關(guān)學(xué)科（如婦科、產(chǎn)科、生殖、皮膚性?。┑膬?yōu)勢(shì)，實(shí)驗(yàn)操作人員有足夠的時(shí)間熟悉檢測(cè)系統(tǒng)的各環(huán)節(jié)，熟悉評(píng)價(jià)方案。
3.試驗(yàn)方案
臨床試驗(yàn)實(shí)施前，研究人員應(yīng)設(shè)計(jì)科學(xué)合理的臨床研究方案。各臨床研究機(jī)構(gòu)的方案設(shè)置應(yīng)基本一致，且保證在整個(gè)臨床試驗(yàn)過(guò)程中遵循預(yù)定的方案實(shí)施，不可隨意改動(dòng)。
受試人群應(yīng)盡可能全面地代表預(yù)期適用人群。體外診斷試劑的比較研究試驗(yàn)中應(yīng)對(duì)受試者樣本設(shè)盲，并使檢測(cè)順序隨機(jī)，以避免因操作者和檢測(cè)結(jié)果的評(píng)價(jià)者知曉受試者的疾病診斷或?qū)Ρ仍噭z測(cè)結(jié)果等信息而引入偏倚。
對(duì)于沙眼衣原體和/或淋病奈瑟菌核酸檢測(cè)試劑而言，如果試驗(yàn)用體外診斷試劑與對(duì)比試劑由于樣本采集、處理、保存等差異導(dǎo)致不能使用同一份樣本進(jìn)行檢測(cè)（例如：適用樣本為拭子樣本，但兩種方法適用的拭子材質(zhì)和保存液不同的情況），此時(shí)可針對(duì)每位受試者分別采集樣本并進(jìn)行試驗(yàn)用試劑和對(duì)比試劑的檢測(cè)，兩次采集樣本的順序應(yīng)遵循隨機(jī)原則。
試驗(yàn)用體外診斷試劑檢測(cè)應(yīng)與臨床參考方法的診斷或?qū)Ρ仍噭┑臋z測(cè)同步進(jìn)行，以避免因疾病進(jìn)程不同或樣本采集時(shí)間不同而造成臨床試驗(yàn)結(jié)論偏離真值。不同臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)在臨床試驗(yàn)中應(yīng)盡可能統(tǒng)一試驗(yàn)操作和判讀標(biāo)準(zhǔn)等。
應(yīng)明確統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)假設(shè)，如評(píng)價(jià)試驗(yàn)用體外診斷試劑與對(duì)比試劑是否等效的標(biāo)準(zhǔn)，并提出適合的數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析方法。建議根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，對(duì)檢測(cè)樣本的類(lèi)型和數(shù)量提出要求。
4.受試者
沙眼衣原體和/或淋病奈瑟菌檢測(cè)應(yīng)與臨床癥狀、體征及其他診斷方法相結(jié)合，用于相關(guān)病原體感染的輔助診斷。臨床試驗(yàn)受試者應(yīng)包括各種可能接受沙眼衣原體和/或淋病奈瑟菌感染檢查的人群，例如具有生殖道沙眼衣原體感染和/或淋病癥狀的患者、性伴淋病感染史、性伴沙眼衣原體感染史、有不安全性接觸史或多性伴史、與患者密切接觸史以及無(wú)相關(guān)臨床癥狀的患者/人群、有眼部感染癥狀的新生兒患者（如涉及）。男性和女性受試者應(yīng)盡量均勻分布。
另外，建議根據(jù)流行病學(xué)證據(jù)納入不同地區(qū)的患者/人群，以驗(yàn)證本產(chǎn)品的臨床檢出能力。
5.樣本類(lèi)型及數(shù)量
對(duì)于男性，樣本類(lèi)型通常為尿道拭子或尿液（首選尿沉渣、晨尿），可能涉及前列腺液或其他泌尿道樣本類(lèi)型。對(duì)于女性，樣本類(lèi)型通常為宮頸拭子或陰道拭子，可能涉及尿道拭子、尿液或其他生殖道樣本類(lèi)型。如涉及新生兒，樣本類(lèi)型可為眼結(jié)膜刮片或眼部分泌物。
對(duì)于檢測(cè)中常用的樣本類(lèi)型，臨床試驗(yàn)總樣本數(shù)應(yīng)不少于500例，其中沙眼衣原體陽(yáng)性例數(shù)不少于200例，淋病奈瑟菌陽(yáng)性例數(shù)不少于100例。對(duì)于與病原體分離培養(yǎng)鑒定進(jìn)行比較研究試驗(yàn)的情況，經(jīng)培養(yǎng)鑒定結(jié)果為陽(yáng)性的樣本中沙眼衣原體陽(yáng)性例數(shù)不少于50例，淋病奈瑟菌陽(yáng)性例數(shù)不少于25例。
對(duì)于增加與常用（或已有）樣本類(lèi)型具有可比性的其他樣本類(lèi)型的情況，應(yīng)在兩家以上（含兩家）臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)開(kāi)展試驗(yàn)。在滿(mǎn)足一種樣本類(lèi)型不少于500例的前提下，增加臨床試驗(yàn)樣本不少于200例，其中沙眼衣原體陽(yáng)性例數(shù)不少于80例，淋病奈瑟菌陽(yáng)性例數(shù)不少于40例。對(duì)于與病原體分離培養(yǎng)鑒定進(jìn)行比較研究試驗(yàn)的情況，經(jīng)培養(yǎng)鑒定結(jié)果為陽(yáng)性的樣本中沙眼衣原體陽(yáng)性例數(shù)不少于20例，淋病奈瑟菌陽(yáng)性例數(shù)不少于10例。
對(duì)于樣本類(lèi)型包含尿液的情況，除與已上市同類(lèi)產(chǎn)品進(jìn)行比較研究試驗(yàn)外，還應(yīng)與檢測(cè)中常用的樣本類(lèi)型（如尿道拭子、宮頸拭子）進(jìn)行同源樣本比較研究試驗(yàn)。同源樣本比較研究試驗(yàn)總樣本數(shù)應(yīng)不少于500例。
鑒于此類(lèi)產(chǎn)品的樣本采集方法不易標(biāo)準(zhǔn)化，并且對(duì)檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性至關(guān)重要。因此，如產(chǎn)品采用不止一種樣本采集方法（包括使用的采集設(shè)備和樣本收集/保存介質(zhì)），應(yīng)在兩家以上（含兩家）臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)開(kāi)展試驗(yàn)。針對(duì)不同的樣本采集方法進(jìn)行同源樣本的比較研究試驗(yàn)，證明不同的樣本采集方法不會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果，樣本例數(shù)不少于100例。
用于上述試驗(yàn)的來(lái)源于男性和女性的樣本比例應(yīng)相近，其中陽(yáng)性樣本應(yīng)包含一定數(shù)量的醫(yī)學(xué)決定水平附近樣本或灰區(qū)樣本，并在檢測(cè)范圍內(nèi)的不同水平均有分布。在病例選擇時(shí)可考慮具有不同臨床癥狀、體征的患者，不同藥物治療的患者等。陰性樣本主要考慮可能存在的交叉反應(yīng)以及臨床需要鑒別診斷的情況：如生殖道支原體感染，其他病原體引起的陰道炎、子宮頸炎、尿道炎等。
6.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
應(yīng)選擇合適的統(tǒng)計(jì)方法對(duì)臨床試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。對(duì)于此類(lèi)定性檢測(cè)試劑的比較研究試驗(yàn)，常選擇配對(duì)四格（2×2）表或列聯(lián)表的形式總結(jié)試驗(yàn)用體外診斷試劑與對(duì)比試劑的檢測(cè)結(jié)果，計(jì)算陽(yáng)性符合率、陰性符合率、總符合率以及95%置信區(qū)間。并對(duì)定性結(jié)果進(jìn)行配對(duì)χ2檢驗(yàn)或kappa檢驗(yàn)。注意結(jié)果不符樣本的復(fù)核結(jié)果不應(yīng)納入上述統(tǒng)計(jì)。
另外，應(yīng)對(duì)不同性別的受試者、不同的樣本類(lèi)型、不同的樣本采集方法（如涉及）進(jìn)行分層，并針對(duì)不同亞組的檢測(cè)結(jié)果分別進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
對(duì)于樣本類(lèi)型包含尿液的情況，建議同源樣本比較研究試驗(yàn)陽(yáng)性符合率和陰性符合率95%置信區(qū)間的下限均應(yīng)高于85%。
7.結(jié)果不符的樣本
在數(shù)據(jù)收集過(guò)程中，對(duì)于兩種試劑的檢測(cè)結(jié)果不一致的樣本，應(yīng)進(jìn)行第三方復(fù)核，并結(jié)合受試者的臨床診斷信息對(duì)差異原因進(jìn)行分析。如無(wú)需復(fù)核，應(yīng)詳細(xì)說(shuō)明理由。
?。ò耍┊a(chǎn)品技術(shù)要求
申請(qǐng)人應(yīng)當(dāng)在原材料質(zhì)量和生產(chǎn)工藝穩(wěn)定的前提下，根據(jù)申請(qǐng)人產(chǎn)品研制、前期臨床評(píng)價(jià)等結(jié)果，依據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及相關(guān)文獻(xiàn)，按照《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫(xiě)指導(dǎo)原則》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第9號(hào)）的有關(guān)要求，編寫(xiě)產(chǎn)品技術(shù)要求。
沙眼衣原體和/或淋病奈瑟菌檢測(cè)試劑的產(chǎn)品性能指標(biāo)應(yīng)主要包括：物理性狀、陰/陽(yáng)性參考品符合率、最低檢測(cè)限、精密度、試劑盒內(nèi)陰/陽(yáng)性對(duì)照品（質(zhì)控品）的符合性等。陽(yáng)性參考品主要考察對(duì)試劑盒覆蓋范圍內(nèi)不同血清型或菌株類(lèi)型的檢測(cè)能力，陰性參考品則重點(diǎn)對(duì)申報(bào)試劑的分析特異性進(jìn)行驗(yàn)證。
如果申報(bào)試劑已有適用的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品、參考品發(fā)布，則申請(qǐng)人應(yīng)在產(chǎn)品技術(shù)要求中提出檢驗(yàn)要求。
按照《辦法》的規(guī)定，此類(lèi)產(chǎn)品為第三類(lèi)體外診斷試劑。申請(qǐng)人應(yīng)按照《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫(xiě)指導(dǎo)原則》的規(guī)定，以附錄形式明確主要原材料、生產(chǎn)工藝及半成品要求。附錄的編制應(yīng)符合相關(guān)編寫(xiě)規(guī)范的要求，主要原材料部分建議包括目標(biāo)物的基因位點(diǎn)區(qū)域，引物/探針的設(shè)計(jì)及來(lái)源（包括目標(biāo)物和內(nèi)對(duì)照），各種酶的來(lái)源、技術(shù)指標(biāo)和驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)，企業(yè)參考品的來(lái)源、組成、陰陽(yáng)性或量值的確認(rèn)，內(nèi)對(duì)照和質(zhì)控品的設(shè)置和驗(yàn)證情況等內(nèi)容。
（九）產(chǎn)品檢驗(yàn)報(bào)告
根據(jù)《辦法》的要求，申請(qǐng)注冊(cè)的第三類(lèi)體外診斷試劑產(chǎn)品應(yīng)在具有相應(yīng)醫(yī)療器械檢驗(yàn)資質(zhì)和承檢范圍的醫(yī)療器械檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)進(jìn)行連續(xù)3個(gè)生產(chǎn)批次樣品的注冊(cè)檢驗(yàn)。對(duì)于已經(jīng)有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品、參考品的檢測(cè)項(xiàng)目，應(yīng)采用相應(yīng)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品、參考品進(jìn)行注冊(cè)檢驗(yàn)。對(duì)于目前尚無(wú)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品的、參考品的檢測(cè)項(xiàng)目，生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)建立自己的參考品體系并提供相應(yīng)的企業(yè)參考品。
（十）產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
說(shuō)明書(shū)承載了產(chǎn)品預(yù)期用途、標(biāo)本采集及處理、檢驗(yàn)方法、檢驗(yàn)結(jié)果解釋以及注意事項(xiàng)等重要信息，是指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)室工作人員正確操作、臨床醫(yī)生針對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果給出合理醫(yī)學(xué)解釋的重要依據(jù)。產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的格式應(yīng)符合《體外診斷試劑說(shuō)明書(shū)編寫(xiě)指導(dǎo)原則》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第17號(hào)）的要求，進(jìn)口體外診斷試劑的中文說(shuō)明書(shū)除格式要求外，其內(nèi)容應(yīng)盡量保持與原文說(shuō)明書(shū)的一致性，翻譯力求準(zhǔn)確且符合中文表達(dá)習(xí)慣。產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)中相關(guān)技術(shù)內(nèi)容均應(yīng)與申請(qǐng)人提交的注冊(cè)申報(bào)資料中的相關(guān)研究結(jié)果保持一致，如某些內(nèi)容引用自參考文獻(xiàn)，則應(yīng)以規(guī)范格式對(duì)此內(nèi)容進(jìn)行標(biāo)注，并單獨(dú)列明文獻(xiàn)的相關(guān)信息。
下面對(duì)沙眼衣原體和/或淋病奈瑟菌檢測(cè)試劑說(shuō)明書(shū)的重點(diǎn)內(nèi)容進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。
1．【預(yù)期用途】
應(yīng)至少包括以下內(nèi)容：
1.1該產(chǎn)品用于定性檢測(cè)人宮頸拭子、陰道拭子、尿道拭子、尿液或其他類(lèi)型樣本中的沙眼衣原體和/或淋病奈瑟菌，適用樣本類(lèi)型應(yīng)結(jié)合申報(bào)產(chǎn)品的臨床性能的確認(rèn)情況進(jìn)行描述。
1.2目標(biāo)物的特征：簡(jiǎn)要描述病原體生物學(xué)特征及致病性，沙眼衣原體血清型、淋病奈瑟菌菌株類(lèi)型的劃分，感染后臨床表現(xiàn)，相關(guān)的實(shí)驗(yàn)室診斷方法等。
1.3目標(biāo)人群：例如具有生殖道沙眼衣原體感染和/或淋病癥狀的患者、性伴淋病感染史、性伴沙眼衣原體感染史、有不安全性接觸史或多性伴史、與患者密切接觸史以及無(wú)相關(guān)臨床癥狀的患者/人群。
1.4產(chǎn)品功能：結(jié)合目標(biāo)人群的臨床表現(xiàn)和其他診斷指標(biāo)，可用于泌尿生殖道相關(guān)病原體感染的篩查或鑒別診斷。
2.【檢驗(yàn)原理】
2.1 描述試劑盒檢測(cè)能夠覆蓋的沙眼衣原體血清型、淋病奈瑟菌菌株類(lèi)型，目標(biāo)基因序列特征，引物及探針的設(shè)計(jì)，反應(yīng)體系（管）組合形式，內(nèi)對(duì)照和質(zhì)控品的設(shè)置及熒光信號(hào)標(biāo)記等。
2.2 描述核酸提取純化的方法、原理等。
2.3 描述試劑盒的技術(shù)原理，可結(jié)合圖示進(jìn)行說(shuō)明。如反應(yīng)體系中添加了相關(guān)的防止擴(kuò)增產(chǎn)物污染組分（如尿嘧啶DNA糖基化酶），也應(yīng)介紹其作用機(jī)理。
3.【主要組成成分】
3.1詳細(xì)說(shuō)明試劑盒內(nèi)各組分的名稱(chēng)、數(shù)量、成分、濃度等信息，如含有生物源性物質(zhì)，應(yīng)說(shuō)明其生物學(xué)來(lái)源、活性及其他特性；說(shuō)明不同批號(hào)試劑盒中各組分是否可以互換。
3.2 如果試劑盒中不包含用于核酸分離/純化的試劑組分，應(yīng)在此明確經(jīng)驗(yàn)證后推薦配合使用的核酸分離/純化試劑盒的生產(chǎn)企業(yè)、產(chǎn)品名稱(chēng)、注冊(cè)證號(hào)（如有）以及配合使用的儀器等信息。
3.3試劑盒中不包含但對(duì)該項(xiàng)檢測(cè)必須的組分，應(yīng)列出相關(guān)試劑的生產(chǎn)企業(yè)、產(chǎn)品名稱(chēng)以及注冊(cè)證號(hào)（如有）等信息。
4.【儲(chǔ)存條件及有效期】
試劑盒的實(shí)時(shí)穩(wěn)定性、開(kāi)瓶或復(fù)溶穩(wěn)定性、運(yùn)輸穩(wěn)定性、凍融次數(shù)要求等。
5.【適用機(jī)型】
注明所有適用的儀器型號(hào)，并提供與儀器有關(guān)的重要信息以指導(dǎo)用戶(hù)操作。
6.【樣本要求】
重點(diǎn)明確以下內(nèi)容
6.1樣本采集要求：包括樣本采集時(shí)間點(diǎn)的選擇，是否受臨床癥狀、用藥情況等因素的影響等；
6.2樣本采集方法：根據(jù)不同的樣本類(lèi)型，分別詳細(xì)說(shuō)明采集方法和設(shè)備的要求，包括對(duì)采樣拭子、樣本保存容器和保存液的要求等。
6.3樣本處理、運(yùn)輸及保存條件：樣本核酸提取前的預(yù)處理、運(yùn)輸條件、保存條件及期限（短期、長(zhǎng)期）等，冷藏/冷凍樣本檢測(cè)前是否需恢復(fù)至室溫、凍融次數(shù)的要求。如適用，應(yīng)說(shuō)明高于檢測(cè)范圍的樣本是否可以進(jìn)行稀釋?zhuān)⒚鞔_稀釋方法和最高稀釋倍數(shù)。
上述描述均應(yīng)建立在相關(guān)性能評(píng)價(jià)及穩(wěn)定性研究的基礎(chǔ)上。相關(guān)要求若有通用的技術(shù)規(guī)范或指南，則應(yīng)遵循并在此處引用。
7.【檢驗(yàn)方法】
詳細(xì)說(shuō)明試驗(yàn)操作的各個(gè)步驟，包括：
7.1試劑準(zhǔn)備及配制方法、注意事項(xiàng)。
7.2詳細(xì)描述待測(cè)樣本、質(zhì)控品的核酸提取/純化方法，包括條件、步驟及注意事項(xiàng)。
7.3擴(kuò)增反應(yīng)前準(zhǔn)備：加樣體積、順序等。
7.4 PCR各階段的溫度、時(shí)間設(shè)置、循環(huán)設(shè)置及注意事項(xiàng)。
7.5儀器設(shè)置：特殊參數(shù)、結(jié)合探針的熒光素標(biāo)記情況設(shè)置目標(biāo)基因及內(nèi)標(biāo)的熒光通道。
7.6基線、循環(huán)閾值（Ct值）的選擇方法。
7.7質(zhì)量控制方法：試劑盒內(nèi)陰/陽(yáng)性質(zhì)控品、內(nèi)標(biāo)的Ct值范圍要求。
8.【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】
結(jié)合陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照、內(nèi)對(duì)照（內(nèi)標(biāo)）以及目標(biāo)基因的檢測(cè)結(jié)果，以列表形式詳細(xì)描述所有可能出現(xiàn)的結(jié)果組合及相應(yīng)的解釋?zhuān)捎肅t值表示。如存在灰區(qū)，應(yīng)同時(shí)說(shuō)明對(duì)灰區(qū)結(jié)果的處理方式，包括在何種情況下需要進(jìn)行重復(fù)檢測(cè)，重復(fù)檢測(cè)的方法，對(duì)樣本可能采取的優(yōu)化條件（如采集要求或采集方法）等。如適用，也可結(jié)合擴(kuò)增結(jié)果的S形曲線對(duì)灰區(qū)結(jié)果進(jìn)行判定。
9．【檢驗(yàn)方法局限性】
9.1本試劑盒的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)結(jié)合患者的癥狀/體征、病史、其他實(shí)驗(yàn)室診斷結(jié)果等情況進(jìn)行綜合分析以及解釋?zhuān)坏米鳛榛颊吲R床診治或管理的唯一依據(jù)。
9.2導(dǎo)致假陰性結(jié)果的可能性分析：
①不合理的樣本采集、處理、運(yùn)輸及保存條件，樣本中目標(biāo)物滴度過(guò)低；
?、谏逞垡略w和/或淋病奈瑟菌目標(biāo)基因序列的變異或其他原因?qū)е碌男蛄懈淖儯?/p>
③同一患者不同時(shí)間、不同部位或者多次采集樣本會(huì)降低假陰性結(jié)果的可能性。
?、芪唇?jīng)驗(yàn)證的其他干擾，如內(nèi)源性或外源引入樣本的物質(zhì)。
9.3導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果的可能性分析：
①樣本間的交叉污染；
②未經(jīng)驗(yàn)證的其他交叉反應(yīng)物質(zhì)。
10.【產(chǎn)品性能指標(biāo)】
描述產(chǎn)品性能，包括以下內(nèi)容：
10.1分析靈敏度：說(shuō)明不同類(lèi)型樣本的最低檢出限，簡(jiǎn)要介紹最低檢出限的確定方法以及驗(yàn)證最低檢出限所采用的血清型/菌株類(lèi)型。如不同血清型/菌株類(lèi)型之間最低檢出限不同，應(yīng)分別列出。
10.2精密度：說(shuō)明不同類(lèi)型樣本的重復(fù)性和重現(xiàn)性評(píng)價(jià)結(jié)果。
10.3分析特異性：包括交叉反應(yīng)和干擾物質(zhì)
10.3.1可能產(chǎn)生交叉反應(yīng)的其他病原體的驗(yàn)證情況，建議以列表的方式描述病原體名稱(chēng)、型別、濃度等信息。
10.3.2樣本中常見(jiàn)干擾物質(zhì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響，應(yīng)注明可接受的最高限值。
10.4臨床試驗(yàn)：簡(jiǎn)要介紹試驗(yàn)方法、受試者及樣本、試驗(yàn)結(jié)果和結(jié)論等。
11.【注意事項(xiàng)】
應(yīng)至少包括以下內(nèi)容：
11.1如產(chǎn)品含有人源或動(dòng)物源性物質(zhì)，應(yīng)提供具有潛在傳染性的警示性信息。
11.2臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)嚴(yán)格遵守《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理辦法》等有關(guān)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室、臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室的管理規(guī)范。
附件2
《沙眼衣原體和/或淋病奈瑟菌核酸檢測(cè)試劑注冊(cè)技術(shù)審查指導(dǎo)原則（征求意見(jiàn)稿）》反饋意見(jiàn)表
姓名/單位名稱(chēng)： 聯(lián)系人： 聯(lián)系電話：
| 涉及條款 | 原文內(nèi)容 | 建議修改后內(nèi)容 | 依據(jù) |
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其它建議：
來(lái)源：國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局醫(yī)療器械技術(shù)審評(píng)中心
