發(fā)布日期:2017-11-23
日前,《科學》在線報道了美國實施的第一例人體基因改造治療——向血液內注入基因編輯工具,改變一個成年人的基因,進而治療疾病。
此次治療的亨特氏綜合征是由基因缺陷引起——人體內一個名為艾杜糖-2硫酸酯酶(iduronate-2-sulfatase,IDS)的基因無法正確編碼IDS酶,沒有IDS酶分解有毒碳水化合物,人體內會積聚有毒代謝物,出現面癱、皰疹、腦脊液等癥狀。
與之前已經通過批準的一些生物治療方法不同,這次的基因編輯過程直接在人體內完成。
無法直接操控、也沒有“遙控”,“事發(fā)現場”直接轉移到“夠不著”的體內,研究者是如何確保基因編輯在復雜的人體內有效、安全、準確地進行呢?
注射入人體的是什么
“這還只是個人體試驗,”國家“千人計劃”創(chuàng)業(yè)人才、生物學者楊光華接受采訪時,提醒科技日報記者說,試驗和之前FDA批準的CAR-T療法處于不同的階段,效果、安全性還都不得而知,要在這個基礎上看待人體內的基因編輯。
“試驗中用到的鋅指核糖核酸酶(ZFN)基因編輯技術專利之前是由Sangamo生物技術公司壟斷的。”一位不愿意透露姓名的基因編輯領域研究人員認為,這個試驗有一定的公司噱頭的味道,對其價值應客觀看待。
“注射物里包含著被‘改造’的病毒。病毒的任務有三:為IDS基因領對路,準確帶進肝臟細胞;編碼ZFN酶,在特異位點準確剪斷基因組;讓IDS基因像‘拼圖的最后一塊’一樣拼進基因組。”楊光華說。
因為有三重任務,所以對這個病毒必須進行一定的改造,楊光華介紹:“為了領對路,病毒外殼上的蛋白殼粒要有能夠特異結合肝臟細胞的特殊受體,這是對它外殼的改造;后兩個功能是對病毒內部DNA的改造,插入能夠啟動的ZFN基因以及缺失的IDS基因。”
將基因帶入人體,除了病毒載體,還可使用非病毒載體。“例如使用納米分子包裹基因或藥物,進入到定向組織之后,釋放這些藥物。”楊光華說,“此外,PEI(一種陽離子聚合物細胞轉染液)技術等都是非病毒的轉染系統(tǒng)。非病毒能夠‘指哪打哪’,但感染性比病毒載體弱一些。”
為什么是ZFN,不是CRISPR?
第三代基因編輯技術CRISPR近年來應用廣泛,“它是RNA指導的剪切,先由RNA識別特異序列再通知蛋白酶來剪切,還從沒用在人體內的基因編輯。”楊光華說,“整合位點精確性上稍差一些。”
“多個鋅指蛋白可以串聯起來形成一個鋅指蛋白組,識別一段特異的堿基序列,具有較強的特異性,不易脫靶。”清華大學國家實驗室生物信息學部特別研究員謝震說,“而第三代技術目前還需要更多的安全性驗證,以確認是否能夠用于臨床治療。”
“ZFN技術是蛋白質指導的剪切,效率比較高。”楊光華說,“輸入的基因編輯工具對于人體來說,滄海一粟,剪切效率高的基因編輯技術成功率更高。”
此外,試驗的實施公司Sangamo對這一編輯技術研究多年,在安全性和操控性上有自己的優(yōu)勢和技術儲備。
用于臨床安全嗎
至于免疫過激問題,謝震表示,目前常用的腺相關病毒的免疫原性比較低,低劑量基本不會引起人體過激反應,病毒DNA整合到人類基因組里的幾率也比較小,是合適的基因編輯工具遞送載體。“我們很高興能看到這個案例,也相信未來會有更多基因編輯技術用于臨床。”謝震說。
“在美國,對于無法治療的重癥,申請方提供大量動物和臨床前的試驗數據,確保技術安全性,就容易被FDA批準進行人體的試驗研究,尤其是對于比較新的基因及細胞治療等技術而言。”楊光華說。
來源:科技日報